蛋白純化技術(shù)研討學(xué)習(xí)班

發(fā)布時間：2024-01-10

【蛋白純化技術(shù)背景介紹】

蛋白純化技術(shù)是從復(fù)雜生物樣品（如細(xì)胞提取物、組織液等）中分離并獲得高純度目標(biāo)蛋白質(zhì)的生物技術(shù)，重點應(yīng)用在：

基礎(chǔ)科研：為解析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能及相互作用提供純凈樣本，是酶學(xué)研究、蛋白質(zhì)組學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)等領(lǐng)域的實驗基礎(chǔ)。

醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)：是重組蛋白藥物（如胰島素、抗體藥物）、疫苗生產(chǎn)的核心環(huán)節(jié)，直接影響藥物的安全性和有效性。

工業(yè)生產(chǎn)：保障食品、洗滌劑等行業(yè)中酶制劑等蛋白產(chǎn)品的質(zhì)量與活性，提升生產(chǎn)效率。

等生物醫(yī)藥各個領(lǐng)域，其重要性不言而喻，常用的蛋白純化技術(shù)可根據(jù)分離原理分為多種類型，以下是主要技術(shù)分類及特點：

一、基于溶解度差異的分離技術(shù)

利用蛋白質(zhì)在不同溶液條件下（如鹽濃度、pH、溫度）溶解度的差異進行分離，操作簡單、成本低，常用于粗提。

鹽析法：通過加入高濃度中性鹽（如硫酸銨）破壞蛋白質(zhì)的水化膜，使蛋白質(zhì)沉淀析出。不同蛋白質(zhì)的鹽析所需鹽濃度不同，可分步沉淀分離。

等電點沉淀法：調(diào)節(jié)溶液 pH 至目標(biāo)蛋白質(zhì)的等電點（pI），此時蛋白質(zhì)凈電荷為零，溶解度最低而沉淀。適用于分離等電點差異較大的蛋白質(zhì)。

有機溶劑沉淀法：加入乙醇、丙酮等有機溶劑，降低溶液介電常數(shù)，促使蛋白質(zhì)脫水沉淀。需在低溫下操作以減少蛋白變性。

二、基于分子大小的分離技術(shù)

根據(jù)蛋白質(zhì)分子質(zhì)量（或體積）的差異實現(xiàn)分離，常用于去除大分子雜質(zhì)或小分子污染物。

u透析與超濾：

透析：利用半透膜的選擇性透過性，使小分子雜質(zhì)（如鹽、緩沖液成分）透過膜擴散到外部溶液，保留大分子蛋白質(zhì)。適用于脫鹽或更換緩沖液。

超濾：在壓力驅(qū)動下，小分子通過超濾膜，大分子蛋白質(zhì)被截留，可同時實現(xiàn)濃縮和脫鹽，效率高于透析。

u凝膠過濾層析（分子篩層析）：將樣品過填充有多孔凝膠顆粒的層析柱，小分子蛋白質(zhì)進入凝膠孔隙，流經(jīng)路徑長、流速慢；大分子無法進入孔隙，路徑短、先流出。根據(jù)洗脫順序可分離不同分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)。

三、基于電荷差異的分離技術(shù)

利用蛋白質(zhì)表面凈電荷的差異進行分離，分辨率較高，是常用的精細(xì)純化手段。

v離子交換層析：層析柱填充帶固定電荷的樹脂（陽離子交換樹脂帶負(fù)電，陰離子交換樹脂帶正電），目標(biāo)蛋白質(zhì)根據(jù)自身凈電荷與樹脂發(fā)生靜電吸附，再通過改變緩沖液的鹽濃度或 pH，使蛋白質(zhì)解吸附并洗脫。適用于分離電荷差異明顯的蛋白質(zhì)，如重組蛋白與雜蛋白的分離。

v等電聚焦電泳（IEF）：在凝膠中建立 pH 梯度，蛋白質(zhì)在電場中遷移至自身等電點的 pH 區(qū)域后停止移動，形成聚焦帶，可實現(xiàn)高分辨率分離，常用于分析或微量純化。

四、基于特異性親和力的分離技術(shù)

利用目標(biāo)蛋白質(zhì)與特定配體的特異性相互作用（如抗原 - 抗體、酶 - 底物、標(biāo)簽 - 配體）進行分離，特異性極強，是純化重組蛋白的核心技術(shù)。

親和層析：層析柱固定與目標(biāo)蛋白特異性結(jié)合的配體（如抗體、金屬離子、鎳柱（His 標(biāo)簽）、谷胱甘肽（GST 標(biāo)簽）），樣品中只有目標(biāo)蛋白會與配體結(jié)合，其他雜質(zhì)直接流出；再用洗脫液（如含競爭性配體的溶液）將目標(biāo)蛋白洗脫。一步純化即可獲得高純度蛋白，廣泛應(yīng)用于帶標(biāo)簽重組蛋白的純化（如 His-tag、Flag-tag 蛋白）。

免疫親和層析：以目標(biāo)蛋白的特異性抗體為配體，特異性極高，適用于天然蛋白或無標(biāo)簽重組蛋白的純化。

五、基于密度差異的分離技術(shù)

離心技術(shù)：通過離心產(chǎn)生的離心力，使不同密度、大小的蛋白質(zhì)顆?；蚣?xì)胞碎片沉降速度不同而分離。如差速離心可分離細(xì)胞碎片與上清液，密度梯度離心（如蔗糖梯度）可分離亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)或不同密度的蛋白質(zhì)復(fù)合物。

六、其他輔助技術(shù)

電泳技術(shù)：如 SDS - 聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），除了用于蛋白純度鑒定，也可通過切膠回收實現(xiàn)微量蛋白的純化。

疏水作用層析：利用蛋白質(zhì)表面疏水性與疏水柱填料的相互作用，在高鹽條件下結(jié)合、低鹽條件下洗脫，適用于分離疏水性差異較大的蛋白。

     由于蛋白純化技術(shù)種類繁多，技術(shù)復(fù)雜度高，實際使用過程中，需要根據(jù)樣本和純化蛋白的具體特性，各種技術(shù)靈活搭配組合使用，以獲得較好的純化效果，因此經(jīng)驗性比較強，學(xué)習(xí)難度大，高校課堂也缺少相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)化、實戰(zhàn)化的課程體系，是產(chǎn)教融合課程體系構(gòu)建的重點內(nèi)容。

    為幫助企業(yè)研發(fā)技術(shù)人員、高校教師、研究生等深入學(xué)習(xí)這門技術(shù)，我們生物人學(xué)堂安排了蛋白純化技術(shù)產(chǎn)業(yè)活動周，邀請優(yōu)秀的企業(yè)專家技術(shù)團隊紛紛“等堂獻(xiàn)藝”，展示蛋白純化技術(shù)的個中奧妙、技術(shù)細(xì)節(jié)。同時特邀在該領(lǐng)域有深厚積累的專業(yè)資深的產(chǎn)業(yè)專家、高校教師重點擔(dān)綱，為大家奉上一場蛋白技術(shù)學(xué)習(xí)的盛宴，歡迎大家積極參與，一起推動產(chǎn)教融合技術(shù)進步！

【學(xué)習(xí)安排】

三天吃透蛋白純化技術(shù)：從理論到實操，手把手帶你快速進階

多年經(jīng)驗的傾囊相授，從樣品處理到目標(biāo)蛋白分離的全流程解析，專家陪跑帶您快速進階！

理論 + 實操 雙軌教學(xué)，實戰(zhàn)化演練

l資深技術(shù)專家多年實戰(zhàn)經(jīng)驗分享和原理深度解析

l理論講解結(jié)合技術(shù)實操，成熟技術(shù)轉(zhuǎn)移

l親和層析和離子交換層析典型方法案例實操學(xué)習(xí)

l從層析柱裝填、儀器操作到樣品預(yù)處理，純化、酶活分析、全程手把手指導(dǎo)，親自動手完成從粗提液到高純度蛋白的完整純化流程。

l數(shù)據(jù)分析和計算及常見問題解析，了解關(guān)鍵技術(shù)原理。

l學(xué)生技能大賽實驗設(shè)計輔導(dǎo)

l教師科研項目設(shè)計輔導(dǎo)

無論你是剛接觸蛋白純化的科研新人，還是想提升效率的實驗室骨干，抑或是高校的專業(yè)教師，三天時間，讓你從 “懂概念” 到 “能上手”，真正實現(xiàn)技術(shù)落地。名額有限，即刻報名，讓專業(yè)導(dǎo)師帶你跳過試錯坑，少走半年彎路，高效掌握蛋白純化核心技能！

線上學(xué)習(xí) 8月17-21 每晚8點

線下學(xué)習(xí) 8月22-24全天

   生物人基地專注于產(chǎn)業(yè)技術(shù)的深度學(xué)習(xí)和交流，圍繞相關(guān)產(chǎn)品工藝和技術(shù)細(xì)節(jié)進行深入的探討和交流，讓學(xué)員少走彎路，有效解決實際問題，期待您的到來！ 

【本期專家】

胡振新：生物化學(xué)博士，生物醫(yī)藥高級工程師，江蘇省產(chǎn)業(yè)教授/中國藥科大學(xué)獨墅湖基地研究生導(dǎo)師。主持國家省級項目（蛋白相關(guān)）2項。晶睿生物聯(lián)合創(chuàng)始人，從事蛋白純化25年，發(fā)表論文18篇，授權(quán)專利15項（其中發(fā)明專利8項）。2008-2012年師從美國資深科學(xué)院院士Benkovic進行博士后研究，2012年回國創(chuàng)業(yè)至今，發(fā)表論文總影響因子117。科技成果證書2項（第1完成人）。2013年獲得中國創(chuàng)業(yè)大賽二等獎，2015年獲得蘇州工業(yè)園區(qū)創(chuàng)業(yè)領(lǐng)軍人才，所創(chuàng)企業(yè)于2019及2024年獲得國家高新企業(yè)證書，2020榮登未來醫(yī)療100強分子診斷Top20。研究方向為蛋白工程化改造及創(chuàng)新性核酸檢測技術(shù)的開發(fā)等?，F(xiàn)主持國家生物藥技術(shù)創(chuàng)新中心揭榜掛帥項目1項，江蘇省自然基金1項。

章驥：浙江大學(xué)生命科學(xué)院高級實驗師，武漢大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)碩士畢業(yè)；2001.12–迄今，在浙江大學(xué)國家級生物實驗教學(xué)中心從事實驗教學(xué)達(dá)二十多年，主要參與生物化學(xué)實驗和發(fā)育生物學(xué)實驗建設(shè)與教學(xué)工作，具有豐富的生物學(xué)實驗教學(xué)經(jīng)驗，出版教材生物化學(xué)實驗，ISBN 978-7-308-03025-0，浙江大學(xué)出版社，2002；參與教改項目2021年度第一批本科教材建設(shè)項目和本科MOOC建設(shè)項目（生物化學(xué)實驗），其主導(dǎo)的生物化學(xué)實驗課，獲得省一流課程。

【會議組織機構(gòu)】

主辦單位：

上海臨港新片區(qū)生命藍(lán)灣產(chǎn)教聯(lián)合體

上海生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)學(xué)院

上海高端醫(yī)療裝備產(chǎn)業(yè)園

上海嘉北生物醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司

上海嘉定先進技術(shù)創(chuàng)新與育成中心

蘇州納米生物科技園

太倉沙溪生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)園

協(xié)辦單位：

上海生物醫(yī)藥行業(yè)協(xié)會

上海市生物醫(yī)藥科技產(chǎn)業(yè)促進中心

承辦單位：

上海農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院

上海楚豫生物科技有限公司/生物人教育培訓(xùn)基地和跨企業(yè)培訓(xùn)中心

支持單位：

全國生物技術(shù)職業(yè)教育教學(xué)指導(dǎo)委員會生物檢驗專委會      

【支持企業(yè)和媒體】

支持企業(yè)：上海雅心生物、上海金鵬生物、蘇州晶睿生物、上海昂玳醫(yī)學(xué)、上海柏辰生物、易孛特生命科學(xué)。。。

支持媒體：生物人、IVD工具人、生物器材網(wǎng)、IVD資訊 。。。

【活動形式】

線上大家談：邀請行業(yè)資深技術(shù)專家圓桌論壇，談產(chǎn)業(yè)發(fā)展和技術(shù)演化。

線上專題論述：就某一技術(shù)專題邀請產(chǎn)業(yè)專家詳細(xì)論述。

線下技術(shù)培訓(xùn)交流：就具體技術(shù)細(xì)節(jié)和產(chǎn)品工藝實操演練學(xué)習(xí)。

線下展會：設(shè)備產(chǎn)品線下集中展示，歷時一個月，提供專業(yè)技術(shù)人員協(xié)助操作演示和試用，用戶學(xué)員可以來深入了解洽談交流。

參觀學(xué)習(xí)：參觀上海高端醫(yī)療裝備產(chǎn)業(yè)園“上海械谷/聯(lián)影小鎮(zhèn)”項目。

人才培養(yǎng)輸送：搭建蛋白技術(shù)產(chǎn)教聯(lián)盟，根據(jù)企業(yè)需求，為聯(lián)盟內(nèi)的企業(yè)定制化招募培養(yǎng)和輸送蛋白技術(shù)技能人才。

本次學(xué)習(xí)圍繞蛋白純化技術(shù)的技術(shù)細(xì)分、操作流程、儀器設(shè)備、試劑耗材、交叉復(fù)合應(yīng)用等系列內(nèi)容，從線上到線下為大家詳細(xì)剖析，同時構(gòu)建蛋白技術(shù)產(chǎn)教聯(lián)盟，聚集優(yōu)質(zhì)產(chǎn)業(yè)資源搭建一站式的服務(wù)平臺，適合企業(yè)研發(fā)/高校教師的業(yè)務(wù)提升、技術(shù)梳理和科研轉(zhuǎn)化，歡迎大家踴躍報名、積極參與。

【講課時間】

線下學(xué)習(xí)全年滾動開班，分期授課，本期學(xué)習(xí)時間如下：2025年8月17-24日

線上學(xué)習(xí)：

8月17-21日 每晚8點 線上直播學(xué)習(xí)

線下學(xué)習(xí)：

8月22-24日 全天 線下實操學(xué)習(xí)

【課程適合人群】

適合企業(yè)員工的技術(shù)梳理和深造，高校教師的業(yè)務(wù)提升，研究生的實驗技能學(xué)習(xí)以及本?？圃盒Ｔ谛W(xué)生的興趣拓展和技術(shù)深入學(xué)習(xí)等，歡迎大家踴躍報名積極參與。 

【學(xué)習(xí)報名】
線上學(xué)習(xí)采取公益形式，不收取費用，人數(shù)不限，歡迎大家踴躍報名積極參與；線下學(xué)習(xí)涉及到實驗操作，為保證學(xué)習(xí)效果，每期招收人數(shù)控制在30人以內(nèi)，會收取一定的實驗費用，歡迎大家及時報名。
公司名稱：上海楚豫生物科技有限公司
開戶銀行：中國民生銀行股份有限公司上海田林支行
帳號：691774185       

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上海市嘉定區(qū)興賢路1180號育成生物園7幢3樓

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